技術指標 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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漢中天祥礦業(yè)設備有限公司(13772838783),專業(yè)制造雙輥節(jié)能雷蒙磨
一、 雙輥節(jié)能雷蒙磨簡介:
漢中天祥礦業(yè)設備有限公司自主研制開發(fā)的天祥牌大、中、小型雷蒙磨,運用現(xiàn)代設計手段,采用的粉碎理論,使產(chǎn)品技術與性得到有機融合。該系列設備為國內(nèi)規(guī)格機型,機器集磨粉、分級、收集于一體,由主機、分析機、鼓風機、管道系統(tǒng)等組成,整機結構緊湊。設備安裝簡單、維修方便,機械系統(tǒng)占地面積小,耗電量低、操作簡單,用戶容易掌握。經(jīng)過上百次的技術改進,并不斷運用新的科技成果,使我們制造的雷蒙磨,質量始終優(yōu)于同類產(chǎn)品,技術更加。經(jīng)廣大客戶使用證明:機器振動小、無污染、噪音低、產(chǎn)量高、用電省、投資小、見效快,維修率極低,是國內(nèi)最理想的擺式磨粉機。雙輥節(jié)能雷蒙磨,適應中小型礦山企業(yè)、化工廠、冶煉廠、制藥公司、耐火材料廠、水泥廠等制粉行業(yè)。雷蒙磨屬于閉路循環(huán)的超細磨粉設備,是替代球磨機加工粉體的換代產(chǎn)品,該機的風選氣流是在風機——旋風分離器——管道——風機的內(nèi)部循環(huán)流動作業(yè)的,排出的粉塵及少,操作車間清潔,對環(huán)境雙輥節(jié)能雷蒙磨無污染。
二、雙輥節(jié)能雷蒙磨的優(yōu)勢:
漢中“天祥”牌雙輥節(jié)能雷蒙磨主機的磨輥裝置設計在梅花架中心線的兩頭,使磨輥裝置處于自然的平衡狀態(tài),主機工作相當平穩(wěn),振動很小。主機工作腔內(nèi)磨輥占用的空間小,留出的工作空間更大,鼓風機的高壓風能夠進入更多的工作面積,從而使磨好的細粉有更多的機會被迅速帶出主機,進入旋風收集器,避免了超細粉被反復無效研磨,雙輥節(jié)能雷蒙磨的產(chǎn)量高于普通雷蒙磨的主要原因就在于此。雙輥節(jié)能雷蒙磨的工作負荷極低,本設備比相同規(guī)格的普通雷蒙磨節(jié)電25%,產(chǎn)量比相同規(guī)格的雷蒙磨高出20%。
三、雙輥節(jié)能雷蒙磨的用途和使用范圍:
漢中天祥礦業(yè)設備有限公司制造的雙輥節(jié)能雷蒙磨適用于加工石灰粉、錳礦粉、滑石粉、大、鉀長石粉、方解石粉、鈣粉、膨潤土粉、白云石粉、活性炭粉、高嶺土粉、磷礦粉、耐火材料粉、保溫材料粉、鐵礦粉、煤炭粉、焦碳粉、陶土粉、石英砂等莫氏硬度不大于9級,濕度小于6%的非易燃易暴的礦產(chǎn)、化工、建材等行業(yè)的200多種物料。加工出的成品粉粒度在30-500目范圍內(nèi)任意調(diào)節(jié)。
四、雙輥節(jié)能雷蒙磨的主要技術參數(shù):
參數(shù) 型號
項目 | | | 2R2613A | |
給料粒度(毫米) | | | 5-20 | |
成品粉粒度(目) | | | 30-150 | |
產(chǎn)量(視不同物料)噸/時 | | | 2-3.5 | |
磨輥數(shù)量(個) | | | | |
中心軸轉速(轉/分) | | | | |
磨環(huán)內(nèi)徑×高度(毫米) | | | | |
磨輥直徑×高度(毫米) | | | | |
總重量(噸) | | | | |
外形尺寸:長×寬×高(米) | | | | |
主電機功率(千瓦) | | | | |
風機電機功率(千瓦) | | | | |
分析機電動機功率(千瓦) | | | | |
磨機總功率(千瓦) | | | | |
提升機電機功率(千瓦) | | | | |
破碎機電機功率(千瓦) | | | | |
電磁振動給料功率(千瓦) | | | | |
配套后總功率(千瓦) | | | | |
1.功能簡介:專用于分段定時、定溫調(diào)節(jié),設定時間0-9999分可自設置,最多可分十二段、輸入輸出光電隔離,輸入輸出信號任意組態(tài),斷偶保護,外供電短路保護,PID自整定、手/自動無擾動切換,越限報警任意組態(tài)。 2.輸入信號:萬能輸入,輸入輸出任意組態(tài),外控手/自動輸入(開關量)。 3.輸出信號:電流(mA)、電壓,手/自動狀態(tài)信號輸出(開關量)。 4.串行通訊:RS-485、RS-232、RS-422。 5.精度:±0.25%。 6.供電電壓:220VAC±20V、24VDC±4V。 7.儀表外供電:24VDC/100mA(供外接變送器電源) 8.儀表規(guī)格: 豎式、橫式80×160×100、96×96×100、72×72×100、96×48×100
具備自動運行、手動運行、二段速控制功能 |
調(diào)試簡單,操作直觀,方便,易于使用及維護 |
具有照明、加熱、通風等輔助功能,適用于熱、寒天氣、夜間作業(yè) |
系統(tǒng)內(nèi)各單元均具有自保護功能,故障時有顯示和警示功能 |
具有保護不停機切換功能、自動排故功能 |
具有溫度顯示、風冷和加熱功能 |
性能特點:本產(chǎn)品采用高強度光杠固定上橫梁和工作臺面,使之構成高剛性的門式框架結構。采用伺服電機驅動,伺服電機通過傳動機構帶動移動橫梁上下移動,實現(xiàn)試驗加載過程.主本機采用先進的DSCC-1全數(shù)字閉環(huán)控制系統(tǒng)進行控制及測量,采用計算機進行試驗過程及試驗曲線的動態(tài)顯示,并進行數(shù)據(jù)處理,試驗結束后可通過圖形處理模塊對曲線放大進行數(shù)據(jù)再分析編輯,產(chǎn)品性能達到國際先進水平
主要用于各種保溫材料及金屬、非金屬材料的拉伸、壓縮、彎曲強度等力學性能測試和分析研究?勺詣忧笕ReH、ReL、Rp0.2、Fm、Rt0.5 、Rt0.6、Rt0.65、Rt0.7、Rm、E等試驗參數(shù),并可根據(jù)GB、ISO、DIN、ASTM、JIS等國際標準進行試驗和提供數(shù)據(jù)。
技術參數(shù):
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特點: 1、 軟件及時免費升級 2、 可遠程操作指導常規(guī)試驗、軟件升級、試驗方案的制定及解決疑難問題 3、 可選配4個不同量程傳感器 4、 為了更好的為您服務訂購前為用戶定制試驗方案,根據(jù)不同的實驗材料為您選購相應的機型及夾具, 既可以使本試驗機機達到最佳使用效果又為用戶節(jié)省時間和成本。
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V型調(diào)節(jié)球閥
V型調(diào)節(jié)球閥概述:
V型調(diào)節(jié)球閥采用圓柱型彈簧預載的帶補償性可動金屬閥座結構,密封性能。球芯與閥座不會產(chǎn)生卡阻或脫離,使用壽命長。球芯上的V形切口與金屬閥座之間具有剪切作用,特別適用于控制高粘度,含纖維、固體顆粒及漿料等介質。結構制造紙工業(yè)的紙漿顯得尤為。閥門的流通能力大、壓力損失小、且介質不會沉積在閥體中腔,閥門不僅具有近似等有分比的流量特性、可調(diào)范圍大,最大可調(diào)比為100:1,還具有精確調(diào)節(jié)與定位的功能。
主要零件材質表
零件名稱 | 材質 | |
閥體、閥蓋 | WCB | CF 8 |
密封圈 | 2Cr13+氮化 | 304+氮化 |
球體 | 2Cr13+硬格 | 304+硬格 |
閥座、閥桿 | 2Cr13 | 304 |
墊片 | 柔性石墨+不銹鋼 | 柔性石墨+不銹鋼 |
雙頭螺柱 | 35CrMoA | 1Cr18Ni9Ti |
V型調(diào)節(jié)球閥產(chǎn)品性能規(guī)范
公稱壓力 | 試驗壓力(MPa) | 適用介質 | 適用溫度 | |
殼體試驗 | 密封試驗 | |||
1.6 | 2.4 | 1.76 | 水、油、氣及高粘度,含纖維、固體顆粒等介質 | -28℃~≤550℃ |
2.5 | 3.75 | 2.75 | ||
4.0 | 6.0 | 4.4 | ||
應用規(guī)范 | 連接法蘭 | JB79-59 GB9113 HG20592-97 ANSI B16.5 | ||
檢驗試驗 | JB/T9092-99 API 598 |
三、主要外形尺寸
公稱或壓力級 | 公稱口徑 | 尺寸(mm) | ||||||||
(mm) | (in) | W | L | W1 | L1 | d | d1 | H1 | H | |
PN1.6MPa | 25 | - | 50 | - | 25 | - | 64 | 38 | 57 | 200 |
40 | - | 60 | - | 25 | - | 82 | 49 | 63 | 205 | |
50 | - | 75 | 124 | 32 | 62 | 100 | 60 | 92 | 225 | |
65 | - | 80 | 145 | 38 | 72.5 | 120 | 75 | 100 | 235 | |
80 | - | 100 | 165 | 45 | 82.5 | 131 | 89 | 108 | 260 | |
100 | - | 115 | 194 | 50 | 97 | 158 | 113 | 117 | 270 | |
125 | - | 135 | 210 | 55 | 105 | 180 | 140 | 140 | 320 | |
150 | - | 160 | 229 | 65 | 114.5 | 216 | 164 | 177 | 340 | |
200 | - | 200 | 243 | 80 | 121.5 | 268 | 205 | 200 | 390 | |
250 | - | 240 | 297 | 90 | 148.5 | 326 | 259 | 252 | 420 | |
300 | - | - | 338 | - | 169 | - | 300 | 270 | 510 | |
PN2.5MPa | 25 | - | 50 | - | 25 | - | 64 | 38 | 57 | 200 |
40 | - | 60 | - | 25 | - | 82 | 49 | 63 | 205 | |
50 | - | 75 | 124 | 32 | 62 | 100 | 60 | 92 | 225 | |
65 | - | 85 | 145 | 38 | 72.5 | 120 | 75 | 100 | 235 | |
80 | - | 100 | 165 | 45 | 82.5 | 131 | 89 | 108 | 260 | |
100 | - | 115 | 194 | 50 | 97 | 158 | 113 | 117 | 270 | |
125 | - | 135 | 210 | 55 | 105 | 180 | 140 | 140 | 320 | |
150 | - | 160 | 229 | 65 | 114.5 | 216 | 164 | 177 | 340 | |
200 | - | 200 | 243 | 80 | 121.5 | 268 | 205 | 200 | 390 | |
250 | - | 240 | 297 | 92 | 148.5 | 326 | 259 | 252 | 420 | |
300 | - | - | 338 | - | 169 | - | 300 | 270 | 510 | |
ClASS150 | 25 | - | 50 | - | 25 | - | 64 | 38 | 57 | 200 |
40 | 11/2 | 65 | - | 25 | - | 82 | 49 | 63 | 205 | |
50 | 2 | 75 | 124 | 32 | 62 | 100 | 60 | 92 | 225 | |
65 | 21/2 | 85 | 145 | 38 | 72.5 | 120 | 75 | 100 | 235 | |
80 | 3 | 100 | 165 | 45 | 82.5 | 131 | 89 | 108 | 260 | |
100 | 4 | 115 | 194 | 50 | 97 | 158 | 113 | 117 | 270 | |
125 | 5 | 135 | 210 | 55 | 105 | 180 | 140 | 140 | 320 | |
150 | 6 | 160 | 229 | 65 | 114.5 | 216 | 164 | 177 | 340 | |
200 | 8 | 200 | 243 | 80 | 121.5 | 268 | 205 | 200 | 390 | |
250 | 10 | 240 | 297 | 92 | 148.5 | 326 | 259 | 252 | 420 | |
300 | 12 | - | 338 | - | 169 | - |
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訂貨須知:
一、若訂貨前還未選定型號,請向我們提供您的使用參數(shù):1.公稱通徑 2.產(chǎn)品型號 3.流體性質(包括公稱壓力、溫度、介質) 4.閥體、密封材料 5.連接方式 6.傳動方式.
二、若已經(jīng)由設計單位選定我公司的產(chǎn)品型號,請按型號直接向我司銷售部訂購;
三、當使用的場合非常重要或管路比較復雜時,請您盡量提供設計圖紙和詳細參數(shù),由我們中閥閥門專家為您審核把關。
四、感謝您訪問我公司的網(wǎng)站『http://www.cnvaco.cn 』
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說 明 書:隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進口/國產(chǎn)
產(chǎn)品庫存:
品牌:自主研發(fā)/進口原裝
產(chǎn)品價格:價格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
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人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,正規(guī)專業(yè)的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們聯(lián)系,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質服務進行到底。
供應商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA試劑盒獨特優(yōu)勢:
1、采用全進口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴格引進國際技術標準進行批量生產(chǎn)。
2、先進的優(yōu)化方案:重復性高,可靠性。
3、技術服務:專業(yè),及時,耐心。
4、現(xiàn)貨供應:江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。
ELISA試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
ELISA試劑盒操作步驟:
1、包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應加蓋或將板平放在底部有濕紗布的金屬濕盒中)
2、封閉酶標反應孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3、加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度,應采用較大稀釋體積進行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標反應孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
4、加入酶標抗體:
酶標抗體:根據(jù)酶結合物提供商提供的參考工作稀釋度進行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
首選TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6、終止反應:
每孔加入終止液50μl終止反應,于20min內(nèi)測定實驗結果.
7、結果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒經(jīng)過嚴格交叉反應和干擾測試及穩(wěn)定性試驗;明確的敏感度;針對所有樣品類型達到的性能;廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求;完善的售后服務和免費的技術支持免去您的后顧之憂,凡購買試劑盒者都可享受我公司相應折扣優(yōu)惠,如有需要,可來電咨詢購買!
關于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優(yōu)質的診斷試劑離不開優(yōu)質的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。酶表抗體為與HBsAg有不同結合位點的鼠復合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEI)HBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
LISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。
特點:一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型; 五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
elisa試劑盒測試要求
做好對照
正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實驗條件的選擇
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大