產(chǎn)品簡介

WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞

通過一個pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV40大T抗原對基質(zhì)細胞進行永生化。肌成纖維基質(zhì)細胞株， WPMY-1與RWPE-1細胞一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細胞。 

參數(shù)規(guī)格

1） 來源：前列腺

2） 形態(tài)：成肌細胞，貼壁生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

 WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞

儲存方式

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。

應用領域

僅供科研使用。

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的完全培養(yǎng)基。

4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞

操作流程

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，5%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化10分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4 . 收到細胞后首次傳代將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議客戶凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類；

1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司介紹

賽百慷( 上海 )生物技術(shù)股份有限公司( iCell Bioscience Inc,Shanghai )是一家專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)人體組織源及動物組織源原代細胞、細胞系、iPS細胞等產(chǎn)品，并提供專業(yè)技術(shù)服務外包的技術(shù)企業(yè)，公司總部位于上海。

賽百慷眾多在國內(nèi)國外細胞生物學領域里有著深厚造詣和豐富經(jīng)驗的高端專業(yè)技術(shù)人才，其中不乏的科學家及科學家團隊，聚集全球原代細胞及iPS細胞領域的前沿技術(shù)研發(fā)，逐步形成我國首個開展廣泛合作的細胞產(chǎn)業(yè)聚集地。賽百慷公司已經(jīng)引進了生命科學領域的全套實驗設備，建立了一流的生產(chǎn)研發(fā)實驗室，采用了的行業(yè)技術(shù)標準、制造工藝、質(zhì)檢流程。

公司還積極多方引入資金，打造綜合研發(fā)平臺，力爭率先引領中國iPS細胞的科研事業(yè)進程，已與國內(nèi)外多家大學、科研院所、藥企巨頭建立了良好的合作關系。正是憑借獨有的原代細胞領域原創(chuàng)技術(shù)的優(yōu)勢。

賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務：

一、原代細胞服務

       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；

       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；

       原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等；

       原代細胞相關技術(shù)服務和整體實驗外包服務；

二、細胞株/系服務

       細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書；

       細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導；

       細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等；

三、iPS細胞

       iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）；

       iPS細胞增殖及冷凍保存；

       iPS基礎培養(yǎng)技術(shù)實習；

       新藥及實驗儀器上市前評估；

四、技術(shù)外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務等
 

賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司

      地址：上海市徐匯區(qū)聚科生物園區(qū)銀都路466號3號樓2樓
   
      網(wǎng)址：www.icellbioscience.com